分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中有哪些儀器
發(fā)布時(shí)間：2014-7-23 9:54:18??????點(diǎn)擊：
分子生物學(xué)作為基因工程的上游技術(shù)，其實(shí)驗(yàn)的成果和準(zhǔn)確性將決定下游所有的步驟和最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以構(gòu)建一個(gè)完備的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室是非常重要的，以下就讓我們來看看構(gòu)建一個(gè)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室需要哪些儀器。
1. 冰箱: 根據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要，必須具備不同控溫級(jí)別的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0-10℃的層析冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實(shí)驗(yàn)。
2. 培養(yǎng)箱：37℃恒溫箱用于細(xì)菌的平板培養(yǎng)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3. 恒溫培養(yǎng)搖床：用于大腸桿菌等生物工程菌種的擴(kuò)增。
4. 水浴鍋：用于保溫并進(jìn)行各類實(shí)驗(yàn)。
25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗(yàn)，各種生物化學(xué)酶反應(yīng)等試驗(yàn)的保溫。
含低溫的水浴槽可以用于分子生物學(xué)的質(zhì)粒與基因片段的連接等實(shí)驗(yàn)及用于42度的大腸桿菌感受態(tài)的熱激。
5. 烘箱：主用于烘干實(shí)驗(yàn)器皿，有些需要溫度高些，有些需要溫度低些。用于RNA方面的實(shí)驗(yàn)用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干。
6. 超純水機(jī)：隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，許多實(shí)驗(yàn)對(duì)水純度的要求越來越高，用自來水、蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水，磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應(yīng)、組織和細(xì)胞培養(yǎng)等。
7. 蒸汽消毒鍋：分子生物學(xué)所用大部分試劑，而且實(shí)驗(yàn)用具都應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌。用于小批量物品的隨時(shí)消毒。大批實(shí)驗(yàn)物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時(shí)進(jìn)行消毒。
8. 濾器濾膜：不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
9.各種天平：臺(tái)秤、精密電子分析天平，用于精確稱量各類試劑。
10.液體體積的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯、錐形瓶 等。
11.pH計(jì)：測定溶液中H+的直接電位的儀器，主要通過一對(duì)電極，在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動(dòng)勢用pH值表示出來;
pH試紙：只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計(jì)。而大部分試劑的配制要求嚴(yán)格的pH值，需精確度高(小數(shù)點(diǎn)后兩位)的pH計(jì)。
12. 分光光度計(jì)：光密度、分光光度計(jì)是利用物質(zhì)在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標(biāo)之一，通過所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對(duì)該單色光的吸收值，利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。OD值也可以作為菌濃的檢測指標(biāo)。
13. 高速冷凍離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速25000 r/m ，最大離心力64983g。有冷凍和常溫兩種，多用于制備和手收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
14.超凈工作臺(tái)：內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備，是一種提供局部潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動(dòng)空氣，經(jīng)過低、中效的過濾器后，通過工作臺(tái)面，使實(shí)驗(yàn)操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。
15.電泳系統(tǒng)：電泳技術(shù)是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征，甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。
電泳系統(tǒng)分為電源和電泳槽，電源需經(jīng)穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器，既能提供穩(wěn)定的直流電，又能輸出穩(wěn)定的電壓;水平式電泳槽：一般分為微型電泳槽和大號(hào)水平式電泳槽
16.PCR儀：Polymerase Chain Reaction儀，也稱DNA熱循環(huán)儀，基因擴(kuò)增儀，它是使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進(jìn)行的DNA變性，引物復(fù)性，DNA聚合酶催化的延伸反應(yīng)三個(gè)過程。需要說明的是，有些實(shí)驗(yàn)室可能還需要梯度PCR儀或?qū)嵤露繜晒釶CR儀來進(jìn)行一些特殊的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
17.凝膠成像分析系統(tǒng)：百泰克UltraPowerTM可見光凝膠投射儀是一個(gè)不錯(cuò)的選擇，價(jià)格不到七千，檢測靈敏度能到pg級(jí)(紫外和EB只能到5ng)，而且不用紫外和EB，更安全，操作和拍照非常方便。
18.其他設(shè)備
1. 微波爐：便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱，電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。
2. 制冰機(jī)：用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)操作所需的低溫環(huán)境，以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。 3. 層析裝置：(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。
真空印記系統(tǒng)，DNA合成/測序儀：這些都是對(duì)核酸進(jìn)行深入研究的必備儀器。
4. 磁力攪拌器：多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、快速振蕩混合器：用于混合儀器。
5. 組織勻漿器：超聲組織及細(xì)胞破碎器，用其進(jìn)行樣品的分離提純實(shí)驗(yàn)。
6. 通風(fēng)櫥：很多溶劑能逸出毒氣，必備柜 ，放射性試驗(yàn)還要有有機(jī)玻璃屏蔽。
7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器：用于酚等有機(jī)溶劑的蒸餾。
8. Tip頭、Eppendorf管：
微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌，硅化消毒后反復(fù)使用。對(duì)一些要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)，如RNA的提取、保存等操作，應(yīng)使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應(yīng)備有常用規(guī)格的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細(xì)胞培養(yǎng)塑料平板等。
19. 小型設(shè)備、用具：
定時(shí)器、濾膜、保鮮膜、防護(hù)眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應(yīng)使用棕色試劑瓶，如飽和酚、巰基乙醇等)、記號(hào)筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)
1. 冰箱: 根據(jù)藥品、試劑及多種生物制劑保存的需要，必須具備不同控溫級(jí)別的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑、藥品等。-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。0-10℃的層析冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實(shí)驗(yàn)。
2. 培養(yǎng)箱：37℃恒溫箱用于細(xì)菌的平板培養(yǎng)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3. 恒溫培養(yǎng)搖床：用于大腸桿菌等生物工程菌種的擴(kuò)增。
4. 水浴鍋：用于保溫并進(jìn)行各類實(shí)驗(yàn)。
25-100℃水浴搖床可用于分子雜交試驗(yàn)，各種生物化學(xué)酶反應(yīng)等試驗(yàn)的保溫。
含低溫的水浴槽可以用于分子生物學(xué)的質(zhì)粒與基因片段的連接等實(shí)驗(yàn)及用于42度的大腸桿菌感受態(tài)的熱激。
5. 烘箱：主用于烘干實(shí)驗(yàn)器皿，有些需要溫度高些，有些需要溫度低些。用于RNA方面的實(shí)驗(yàn)用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干。
6. 超純水機(jī)：隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，許多實(shí)驗(yàn)對(duì)水純度的要求越來越高，用自來水、蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水，磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環(huán)。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應(yīng)、組織和細(xì)胞培養(yǎng)等。
7. 蒸汽消毒鍋：分子生物學(xué)所用大部分試劑，而且實(shí)驗(yàn)用具都應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌。用于小批量物品的隨時(shí)消毒。大批實(shí)驗(yàn)物品、試劑、培養(yǎng)基可使用大型消毒且定時(shí)進(jìn)行消毒。
8. 濾器濾膜：不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
9.各種天平：臺(tái)秤、精密電子分析天平，用于精確稱量各類試劑。
10.液體體積的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯、錐形瓶 等。
11.pH計(jì)：測定溶液中H+的直接電位的儀器，主要通過一對(duì)電極，在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動(dòng)勢用pH值表示出來;
pH試紙：只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計(jì)。而大部分試劑的配制要求嚴(yán)格的pH值，需精確度高(小數(shù)點(diǎn)后兩位)的pH計(jì)。
12. 分光光度計(jì)：光密度、分光光度計(jì)是利用物質(zhì)在可見光和紫外線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標(biāo)之一，通過所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對(duì)該單色光的吸收值，利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。OD值也可以作為菌濃的檢測指標(biāo)。
13. 高速冷凍離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速25000 r/m ，最大離心力64983g。有冷凍和常溫兩種，多用于制備和手收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
14.超凈工作臺(tái)：內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備，是一種提供局部潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動(dòng)空氣，經(jīng)過低、中效的過濾器后，通過工作臺(tái)面，使實(shí)驗(yàn)操作區(qū)域成為無菌的環(huán)境。
15.電泳系統(tǒng)：電泳技術(shù)是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特征，甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。
電泳系統(tǒng)分為電源和電泳槽，電源需經(jīng)穩(wěn)流通過穩(wěn)壓器，既能提供穩(wěn)定的直流電，又能輸出穩(wěn)定的電壓;水平式電泳槽：一般分為微型電泳槽和大號(hào)水平式電泳槽
16.PCR儀：Polymerase Chain Reaction儀，也稱DNA熱循環(huán)儀，基因擴(kuò)增儀，它是使一對(duì)寡核苷酸引物結(jié)合到正負(fù)DNA鏈上的靶序列兩側(cè)，從而酶促合成拷貝數(shù)百萬倍的靶序列DNA片段，它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進(jìn)行的DNA變性，引物復(fù)性，DNA聚合酶催化的延伸反應(yīng)三個(gè)過程。需要說明的是，有些實(shí)驗(yàn)室可能還需要梯度PCR儀或?qū)嵤露繜晒釶CR儀來進(jìn)行一些特殊的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
17.凝膠成像分析系統(tǒng)：百泰克UltraPowerTM可見光凝膠投射儀是一個(gè)不錯(cuò)的選擇，價(jià)格不到七千，檢測靈敏度能到pg級(jí)(紫外和EB只能到5ng)，而且不用紫外和EB，更安全，操作和拍照非常方便。
18.其他設(shè)備
1. 微波爐：便于一些溶液的快速加熱和定溫加熱，電泳瓊脂糖凝膠配制、溶化等。
2. 制冰機(jī)：用于制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)操作所需的低溫環(huán)境，以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。 3. 層析裝置：(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。
真空印記系統(tǒng)，DNA合成/測序儀：這些都是對(duì)核酸進(jìn)行深入研究的必備儀器。
4. 磁力攪拌器：多角度旋轉(zhuǎn)混勻器、快速振蕩混合器：用于混合儀器。
5. 組織勻漿器：超聲組織及細(xì)胞破碎器，用其進(jìn)行樣品的分離提純實(shí)驗(yàn)。
6. 通風(fēng)櫥：很多溶劑能逸出毒氣，必備柜 ，放射性試驗(yàn)還要有有機(jī)玻璃屏蔽。
7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器：用于酚等有機(jī)溶劑的蒸餾。
8. Tip頭、Eppendorf管：
微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌，硅化消毒后反復(fù)使用。對(duì)一些要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)，如RNA的提取、保存等操作，應(yīng)使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應(yīng)備有常用規(guī)格的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細(xì)胞培養(yǎng)塑料平板等。
19. 小型設(shè)備、用具：
定時(shí)器、濾膜、保鮮膜、防護(hù)眼鏡鴨嘴鑷、常規(guī)的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應(yīng)使用棕色試劑瓶，如飽和酚、巰基乙醇等)、記號(hào)筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)
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